Epsilon Archive for Student Projects

Abstract

Fryst eller kyld sperma används ofta vid artificiell insemination på hund. Skador kan uppstå på spermierna under frysningsprocessen. För att spermierna ska bibehålla sin viabilitet och undvika skador tillsätts spädningsvätskor som bland annat innehåller sockerarter, antibiotika, glycerol och äggula. Äggula skyddar spermierna mot frysskador och bidrar till en ökad spermieöverlevnad, dock är mekanismen bakom detta ej helt klarlagd. Att äggula ingår i spädningsvätskan kan medföra en risk för mikrobiell kontamination och innebära ett problem vid internationell handel med sperma. Sojalecithin har nyligen lyfts fram som ett icke-animaliskt alternativ till äggula i spädningsvätskor och har framgångsrikt använts vid frysning av sperma från andra djurslag.
Målet med detta arbete var att utvärdera hur hundsperma påverkas av att frysas med en spädningsvätska som innehåller sojalecithin jämfört med en spädningsvätska som innehåller äggula. Sperma från totalt fem hundar delades in i tre delar och frystes in med äggula, 1 % sojalecithin eller 2 % sojalecithin. Efter upptining utvärderades spermiernas livsduglighet efter frysning genom att jämföra motilitet, andel intakta akrosomer samt andel intakta plasmamembraner. Resultaten visar att motiliteten var högre med en äggulebaserad spädningsvätska jämfört med en spädningsvätska baserad på sojalecithin (p<0,0001). Lägre andel intakta plasmamembraner samt lägre andel intakta akrosomer sågs vid frysning med sojalecithinsbaserad spädningsvätska än med äggulebaserad spädningsvätska (p<0,0001 resp. p=0,015). Sammanfattningsvis visade studien på en bättre spermieöverlevnad när spermier frystes med äggulebaserad spädningsvätska jämfört med när spermier frystes med en spädningsvätska baserad på sojalecithin.

Frozen or chilled semen is often used in artificial insemination in dogs. To maintain viability and prevent damages of the spermatozoa, extenders containing sugars, glycerol, antibiotics and egg yolk are added to the semen. Egg yolk prevents cell damages during freezing and cooling, but the mechanism behind this is not fully understood. The presence of egg yolk represents a potential risk of microbial contamination, which can pose a problem in the international exchange of cryopreserved semen. Recently, soybean lecithin has been suggested as an alternative to egg yolk in extenders. Soybean lecithin has successfully been used in the cryopreservation of semen in other species.
The aim of this study was to evaluate the suitability of an extender based on soybean lecithin for freezing of canine semen compared with an extender based on egg yolk. Semen from five dogs was divided into three aliquots and frozen using three different extenders containing egg yolk, 1 % soybean lecithin or 2 % soybean lecithin. The viability of the spermatozoa was evaluated after thawing by examining motility, acrosome integrity and plasma membrane integrity. A higher motility was achieved with an egg yolk based extender compared to an extender based on soy bean lecithin (p<0,0001). Both acrosome integrity and plasma membrane integrity were better with an extender containing egg yolk compared to an extender containing soybean lecithin (p<0,001 and p=0,015). In conclusion, the sperm evaluated in this study had enhanced preservation with an egg yolk based extender compared to an extender based on soybean lecithin.