Epsilon Archive for Student Projects

Abstract

Fransk hjärtmask (Angiostrongylus vasorum) är en nematod som kan orsaka stora skador och stundvis död hos hunddjur. Sjukdomen heter angiostrongylos och förekommer sporadiskt i Sverige, med undantag för på Kosteröarna. Hösten 2023 avled tre av fyra valpar från en uppfödning i centrala Skåne efter en tids hosta. Efter valparnas död provtogs avföring från den kvarlevande valpen som även den uppvisade hosta. I avföringen påvisades larver av A. vasorum. De vuxna hundarna från uppfödningen provtogs och åtta av tio hundar var även de positiva för A. vasorum. Detta väckte en misstanke om etablering av ett första högriskområde (hotspot) i Sverige. Syftet med denna studie var att följa upp förekomsten av A. vasorum i sniglar och hundar i området följande vår och höst efter det att åtgärder vidtagits för att motverka smittspridning.
Sniglarna samlades in under två tillfällen. En gång i mars och en gång i september 2024. De ana-lyserades genom digestion och mikroskopering. Nematodlarver som påträffades sparades för art-bestämning med PCR. Avföring från hundar i området skickades in och analyserades genom Baer-mann tratt-metod.
Resultatet från sniglarna insamlade i mars var genomgående negativa. Däremot prover undersökta i september visade på en hög förekomst nematodlarver (viktat medelvärde 5,79 larver 95 % KI ± 0,61) i uppfödarens trädgård där hundarna bor, jämfört med provtagningsplatser längre bort. Där varierade det viktade medelvärde mellan 0-0,17 (95 % KI ± 0,08). PCR-analys av positiva diges-tioner /larverna var dock negativt för både A.vasorum och rävens lungmask, Crenosoma.vulpis. Alla avföringsprover (22 st) från hundarna var negativa för A.vasorum men det påvisades lung-mask i ett fåtal prover (Crenosoma vulpis, n=2)
De negativa avföringsproverna samt negativa PCR-resultaten tyder på att detta inte är ett högrisk-område. Det är dock viktigt att nämna att trots en lyckad PCR (med fungerande positiva och nega-tiva kontroller) så är det möjligt att A.vasorum larver missades för analys på grund av begränsad erfarenhet av metoden (tvättning av larver och DNA-extraktion). Utökade analyser inkluderade andra hunddjur i området såsom räv är motiverat för att säkert avfärda misstanken om högrisk-område. Vidare diskuteras även i arbetet den till synes bristande effekten av milbemycin på sym-tom och utskiljning av larver i träcken.

The French heartworm (Angiostrongylus vasorum) is a bursate nematode that can cause major and sometimes even lethal damages in the canine species. The disease is called angiostrongylosis. Sweden has previously only had sporadic cases of angiostrongylosis, with the exception of the Koster islands. During fall 2024, three out of four puppies from a breeder in central Skåne died after a period of coughing. After their death the remaining puppy started coughing and a faecal sample was the tested for A. vasorum. The test came back positive. Adult dogs from the breeder was then also tested and eight out of ten dogs were positive for A.vasorum. This raised the suspicion of Sweden’s first documented hotspot. The aim of this study was to examine the occurrence of A. vasorum in snails and dogs in the area to identify what could be Sweden’s first hotspot.
The slugs were collected during two different occasions (once in March and once in September, 2024). They were digested and the material was then examined microscopically. To determine if the nematode larvae found with microscope belonged to A. vasorum or Crenosoma vulpis (the fox lungworm), species-specific PCR assays were conducted. Fecal samples from dogs in the same area were submitted and analysed with the baermann funnel method.
All the slugs collected in March were negative for nematode larvae. The slugs collected in Sep-tember in the breeder’s yard were infected (weighted mean 5,79 nematode larvae 95% CI ±0,61) and harbored more larvae compared to the other sampling sites. The other sampling sites weighted mean varied between 0 – 0,17 larvae (95% CI ±0,08). Despite the frequent occurrence in the yard, PCR tests of the nematodes were negative for both A. vasorum and C. vulpis. All of the fecal samples were negative for A. vasorum even if lungworm larvae were found in some samples (C. vulpis, n=2).
The negative fecal samples combined with the negative PCR from the slugs indicate that this is not a hotspot. It is important to mention that despite a successful PCR setup (with fully working posi-tive and negative controls) it is possible that because of limited experience with sample prepara-tion (purification of larvae from snails and DNA extraction from this material) some A.vasorum larvae were missed. Further analysis including repeated tests on potential intermediate hosts as well as on faecal samples and/or necropsy examination of other canine species in the area, such as foxes, is motivated to safely discard the suspicion of a hotspot completely.
This study also discusses the potential lack of efficacy of milbemycin against the clinical symp-toms and the faecal excretion of A. vasorum larvae.