Epsilon Archive for Student Projects

Abstract

Organoider är små, tredimensionella (3D) cellstrukturer som odlas fram från stamceller i laboratoriemiljö. Ekvina colonoider är en typ av intestinal organoid med ursprung från stamceller från
hästens colon (tjocktarm). Med en relevant sammansättning celler och principiell arkitektur som
efterliknar ursprungligt tarmepitel i colonvävnad, är dessa användbara som in vitro modeller inom
flera områden av den biomedicinska forskningen. I dagsläget finns endast ett fåtal studier som berör
ekvina colonoider. För att komplettera nuvarande forskning och främja fortsatta framsteg var syftet
med denna studie att testa och utvärdera en odlingsmetod för odling av ekvina colonoider. Målet var
att odla fram colonoider för att sedan undersöka förekomsten av epiteliala celler (inkl. stamceller)
genom transkriptionell och histologisk analys. Studien lyckades etablera och odla fram ekvina
colonoider från colonstamceller. Vid karaktärisering av genuttrycket med RT-qPCR påvisades flera
olika celltyper som finns närvarande i ursprungligt colonepitel. Histologiska analyser visade att
colonoiderna hade ett likartad histomorfologiskt utseende jämfört med deras motsvarighet in vivo.
Bägarceller och delande celler kunde även identifieras histologiskt. Sammanfattningsvis demonstrerar studien att metoden för odling och karaktärisering av ekvina colonoider fungerar. Även
om framtida studier kan fokusera på att förfina tekniken ytterligare, kan intestinala organoider
beskrivas som lovande in vitro modeller för framtida forskning inom flertalet områden. I synnerhet
för djurslaget häst som i dagsläget saknar etablerade cellinjer, vilket annars räknas som en av de
vanligaste förekommande metoderna för in vitro-studier.

Organoids are small, three-dimensional (3D) cell structures that are cultivated from stem cells in a
laboratory environment. Equine colonoids are a type of intestinal organoid derived from stem cells
of the horse’s colon (large intestine). With relevant cell composition and basic architecture that
mimics the original intestinal epithelium in colon tissue, these organoids are valuable in vitro models
in various areas of biomedical research. Currently there are few studies focusing on equine
colonoids. To complement current research and add to the ongoing development, this study aimed
to develop and describe the method for cultivation of equine colonoids. The goal was to culture
colonoids and subsequently investigate the presence of epithelial cells (including stem cells) through
transcriptional and histological analysis. The study successfully established and cultured equine
colonoids from colon stem cells. Gene expression characterization performed by qPCR demonstrated presence of several different cell types found in the native colon epithelium. Histological analysis
showed that our cultivated colonoids had similar histomorphological appearance compared to their
in vivo counterparts. Among other epithelial cells in the colonoids, the study identified goblet cells
and proliferating cells histologically. In summary, the study demonstrated that the method used for
cultivating and characterizing equine colonoids was successful. While future research may focus
further on refining the technique, intestinal organoids are promising in vitro models for future
research in several fields. This is particularly significant for the equine species which currently lacks
established cell lines, a method commonly used for in vitro studies.